生物化学与分子生物学实验指导【2025|PDF|Epub|mobi|kindle电子书版本百度云盘下载】

生物化学与分子生物学实验指导PDF格式电子书版下载

注意：本站所有压缩包均有解压码： 点击下载压缩包解压工具

第一篇 生物化学与分子生物学实验基本技术3

第一章 生物化学实验基本操作3

第一节 实验室规则3

第二节 基本实验操作3

一、玻璃仪器的清洗3

二、玻璃仪器的干燥4

三、特殊污物的清洗4

四、塑料器皿的清洗4

五、刻度吸管的使用4

六、可调式微量移液器的使用5

七、溶液的混匀、加热、保温及冷却6

第三节 常用实验仪器的使用6

一、LD5-2A离心机的使用方法6

二、Neofuge 13R台式高速冷冻离心机使用方法7

三、紫外/可见分光光度计的使用方法8

第四节 常用实验标本的制备9

一、血液样本的收集9

二、尿液样本的收集与保存10

三、组织样品的制备10

第五节 实验报告的书写12

一、实验报告基本格式12

二、书写实验报告应注意事项12

第二章 分光光度技术14

第一节 基本原理14

一、光的一般知识14

二、发射光谱与吸收光谱15

三、朗伯-比尔定律15

第二节 分光光度计的结构16

一、光源16

二、分光系统17

三、狭缝17

四、吸收池17

五、检测系统18

第三节 分光光度技术的应用18

一、用于溶液中物质的定量测定18

二、用于溶液中物质的定性测定18

第三章 电泳技术20

第一节 基本原理20

一、电泳的概念20

二、电泳的主要影响因素21

第二节 电泳的分类22

一、按分离目的分类22

二、按分离原理分类22

三、按支持介质分类23

四、其他分类23

第三节 常用电泳技术23

一、纸电泳23

二、乙酸纤维素薄膜电泳23

三、琼脂糖凝胶电泳24

四、聚丙烯酰胺凝胶电泳25

五、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳26

六、等电聚焦电泳27

七、双向电泳28

八、毛细管电泳28

九、单细胞凝胶电泳29

十、脉冲场凝胶电泳29

十一、特殊电泳30

第四章 层析技术32

第一节 基本知识32

一、层析的基本概念32

二、层析技术的分类32

三、层析的基本原理33

第二节 离子交换层析34

一、基本原理34

二、离子交换介质34

三、分离过程36

四、离子交换层析的应用36

第三节 凝胶层析37

一、基本原理37

二、常用凝胶38

三、凝胶层析的应用39

第四节 亲和层析40

一、基本原理40

二、基质与配体的选择40

第五节 高效液相色谱42

一、基本概念42

二、基本装置42

第五章 离心技术45

第一节 基本原理45

一、离心机的力学原理46

二、离心机的工作原理47

第二节 离心机的类型47

一、按速度分类48

二、按用途分类50

第三节 离心机使用及注意事项51

一、离心机的使用51

二、离心机使用及维护51

三、离心过程留意观察52

四、离心完毕后精心处理53

五、使用完毕认真登记53

六、离心机常见故障及排除方法53

第六章 透析技术54

第一节 透析原理及影响因素54

第二节 透析技术的应用55

第三节 透析操作及注意事项55

第七章 生物大分子制备57

第一节 细胞破碎及细胞器分离57

一、细胞破碎57

二、细胞器分离58

第二节 生物大分子的分离与纯化59

一、蛋白质（酶）的分离与纯化59

二、核酸的分离与纯化62

第三节 提纯后的处理64

一、样品的浓缩64

二、样品的干燥及贮存64

第八章 分子生物学基本技术原理66

第一节 核酸分子杂交66

一、核酸分子杂交的基本理论66

二、核酸分子探针67

三、核酸分子杂交的种类与方法70

第二节 DNA克隆技术基本原理72

一、获取目的基因74

二、构建基因载体75

三、限制性内切核酸酶的作用78

四、DNA分子重组79

五、重组DNA分子导入宿主细胞80

六、阳性重组体的筛选和鉴定80

七、克隆基因的表达82

第三节 聚合酶链反应83

一、基本原理与方法83

二、PCR技术的应用84

第四节 实时定量PCR85

一、Ct值定量原理86

二、实时定量PCR荧光标记方法87

三、实时定量PCR技术的应用89

第五节 反转录PCR89

一、模板RNA90

二、反转录引物90

三、反转录酶90

四、离子强度90

五、脱氧核苷三磷酸底物91

第六节 Western印迹91

一、蛋白质凝胶电泳91

二、转膜91

三、封闭92

四、免疫杂交与显色92

第二篇 生物化学与分子生物学教学实验97

第九章 基本理论实验97

实验一 蛋白质的沉淀、变性及等电点的测定97

一、蛋白质的沉淀与变性97

二、蛋白质等电点的测定99

实验二 理化因素对唾液淀粉酶活性的影响101

实验三 琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用104

实验四 脂肪酸的β-氧化作用——酮体的生成和利用106

实验五 血清丙氨酸氨基转移酶活性测定（赖氏法）108

第十章 基本技术实验111

实验六 蛋白质的透析111

实验七 蛋白质的定量测定（一）：酚试剂法（改良Lowry法）112

实验八 蛋白质的定量测定（二）：紫外分光光度法115

实验九 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳116

实验十 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳118

实验十一 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量121

实验十二 肌肉组织氨基移换作用（纸层析法）125

实验十三 胡萝卜素的柱层析分离128

实验十四 碱性磷酸酶米氏常数的测定129

第十一章 综合强化实验134

实验十五 激素对血糖浓度的影响134

一、血糖的定量测定——葡萄糖氧化酶法134

二、胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响135

实验十六 血清γ-球蛋白的分离、纯化及鉴定138

实验十七 核酸的制备及测定141

第十二章 分子克隆技术基础实验148

实验十八 质粒DNA的提取（碱裂解法）148

实验十九 限制性核酸内切酶对质粒DNA的酶切作用150

实验二十 DNA的琼脂糖凝胶电泳151

实验二十一 感受态细菌的制备及质粒DNA的转化154

实验二十二 核酸的分子杂交156

实验二十三 聚合酶链反应体外扩增DNA（PCR）159

实验二十四 反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）162

实验二十五 实时定量PCR （Real-time PCR）166

实验二十六 蛋白质印迹（Western hlotting）179

第十三章 学生设计性实验185

第一节 设计性实验概述185

一、设计性实验的概念185

二、学生设计性实验的基本程序185

第二节 设计性实验的选题和设计186

一、设计性实验的选题186

二、实验设计与实施186

第三节 数据的记录与处理189

一、实验研究的观察记录189

二、实验数据的处理189

第四节 实验报告和论文的撰写190

一、实验报告的撰写190

二、科研论文撰写191

第五节 设计性实验教学组织案例193

第三篇 生物化学与分子生物学常用资料及数据199

第十四章 化学试剂分级及注意事项199

第一节 一般化学试剂的分级199

一、化学试剂的分级199

二、易变质及需要特殊方法保存的试剂199

第二节 试剂配制的一般注意事项200

第十五章 常用试剂配制201

第一节 生物化学与分子生物学实验中常用试剂的配制201

一、有机试剂的配制201

二、细菌培养基和抗生素的配制201

三、生化实验中常用缓冲液配制203

四、常用电泳缓冲液204

五、常用凝胶上样缓冲液的配制204

六、常用贮存液的配制205

七、细菌的保存207

第二节 重铬酸洗液的配制与再生207

附录 常用的生物化学与分子生物学相关网站209

一、国内网站209

二、国外网站209